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TUhjnbcbe - 2022/7/31 16:54:00
01粪便直接涂片的优缺点

1、优点:①设备简单②操作简单③时间短④形象直观,直接了解粪便菌群的“像”,熟练者对诊断菌群失调有较高的准确性。

2、缺点:①检验者必须有一定的经验,否则易判断错误②主要是定性检查,确定分度较困难。

02操作技术

1、涂片将新鲜大便直接涂抹在洁净的玻片上,粪便不可稀释以防细菌变形。标本务求新鲜,涂片厚薄适宜。

2、外观肉眼检查外观颜色、形状(若含有膜状物的大便应补做艰难梭菌培养)。

3、镜检染色技术是诊断准确成功的关键,革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌要对比鲜明。镜检时应将涂片视野全面观览,切不可看几个视野就计数或报告。

03检查方法

1、细菌总数:观察菌群涂片首先要总览细菌总数。了解涂片上细菌的数量是增多还是减少,有无优势菌或真菌。细菌总数过多的情况较少见或不易引起重视。菌群失调时细菌总数多在正常、减少或消失。

细菌总数评定标准

每油镜视野细菌数评价

<10显著减少

11—明显减少

—略微减少

—0正常

>0增多

2、观察革兰氏阳性、阴性杆菌及球菌的比率改变

革兰氏阳性杆菌:革兰氏阴性杆菌:革兰氏阳性球菌:革兰氏阴性球菌(包括球菌/杆菌)比率反映了粪便菌群的质素,它一般不受粪便稀释或浓缩的影响,所以较细菌总数有更大的意义,更能反映菌群的本质和预后。

选定有代表性视野中的部分区域作细菌分类计数,需要数—个细菌以求得比例。不同年龄的人的比例都不一样,一般杆菌与球菌比例约为75:25。

04检查要点与报告要点

一、肠道菌群的种类:

正常健康人的粪便,其细菌总数约为0个/g左右,分类可达几百种,绝大多数是专性厌氧菌,约占总数的99.9%,占少数的是兼性厌氧菌、专性需氧菌及微需氧菌。常见的有:

⑴、双歧杆菌属革兰氏阳性无芽胞杆菌。

⑵、优杆菌属(真杆菌属)革兰氏阳性无芽胞杆菌。

⑶、乳杆菌属革兰氏阳性无芽胞杆菌。

⑷、拟杆菌属(类杆菌属)革兰氏阴性无芽胞杆菌。

⑸、肠杆菌属革兰氏阴性无芽胞杆菌。

⑹、消化链球菌属革兰氏阳性球菌。

⑺、消化球菌属革兰氏阳性球菌。

⑻、肠球菌属革兰氏阳性球菌。

⑼、葡萄球菌属革兰氏阳性球菌。

⑽、梭杆菌属革兰氏阴性杆菌。

⑾、梭状芽胞杆菌属革兰氏阳性有芽胞的粗大杆菌。

⑿、酵母菌革兰氏染色阳性,着色不均匀。2肠道菌群粪便涂片检查

二、报告方式:

1、文字描述法:

具体描述细菌总数,革兰氏阳性杆菌、革兰氏阴性杆菌、革兰氏阳性球菌、革兰氏阴性球菌变化,有无优势菌,可能的特征性细菌,并考虑该年龄段菌群特点,提出肠道菌群的初步印象诊断。如:

涂片所见:细菌总数:明显减少

革兰氏阳性杆菌:较正常明显减少

革兰氏阴性杆菌:较正常略减少

革兰氏阳性球菌:较正常增加

革兰氏阴性球菌:未见改变

酵母菌:较正常略有增加

其它:可见少量脓细胞

镜下印象:呈Ⅱ度菌群失调改变

还可在报告中增加描述,如球菌是链球菌,有梭状芽胞杆菌等等,另正常的或未见到的可以不报告,如革兰氏阴性球菌、酵母菌等。

Ⅰ、Ⅱ度菌群失调是数量改变,Ⅲ度菌群失调是质量的改变。

2、菌群失调分度诊断的标准:

分度ⅠⅡⅢ

临床表现为潜伏型,临床症状不明显,是可逆的,即只要去除病因,不经治疗也能恢复。为局限型,通常是不可逆的,即不经治疗难以自然恢复。临床有慢性病的表现。为弥漫型,又称二重感染或菌交替症。主要表现急性腹泻,排便次数多,常见性状多呈粘液性和稀水样、脓血便。病情重或凶险。

粪便外观可以是正常成形软便,或不成形软便或稀便。多为程度不等的稀便,也可为粘液便、水样便、脓血便或柏油样便。多为程度不等的稀便、也可为粘液便,常呈*绿色或黑色。

涂片可见细菌总数在正常范围,正常低值或略有减少;革兰阳性杆菌在正常低值;革兰阴性杆菌多有增加;革兰阳性球菌在正常高值或增加;类酵母样菌、梭菌常有增加;总之,仅是数量和比例轻度改变。细菌总数明显减少或无明显改变,偶见部分病例细菌显著减少;革兰阳性杆菌明显减少;革兰阴性杆菌明显增多,有时达90%以上;有的病例革兰阳性球菌增多(常见有葡萄球菌链球菌)、杆菌和球菌比例倒置(正常值约为75:25左右)。类酵母菌或梭菌呈明显增多,总之,粪便菌群已有明确改变,Ⅱ度菌群失调应补做粪便细菌分离培养和鉴定。细菌总数呈显著减少,粪便中原来的菌群大部分成员被抑制,只有一种细菌或真菌占绝对优势,最常见有葡萄球菌、白色念珠菌、致病性大肠杆菌、艰难梭菌、绿脓杆菌(即铜绿假单胞菌)和肺炎克雷伯菌等。总之,原菌群中的某一种少数菌成为菌群的绝对优势是Ⅲ度菌群失调症的主要特点,应同时做粪便细菌的分离和鉴定。

各度之间并没有一个明显的,指标性的分界线,要严格的区分是有困难的。检验者应根据病人年龄、粪便性状、病情表现、用药治疗等情况,综合进行判断菌群失调。

转载自中华检验医学网

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